1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15ml无菌的离心管，加入8ml预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，brl(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低dmso浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至t25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
mopc, 小鼠少突胶质前体细胞
ma, 小鼠星形胶质细胞
mlf, 小鼠淋巴成纤维细胞
mrtec, 小鼠肾小管上皮细胞
csc, 小鼠心肌细胞
小鼠骨髓间充质干细胞（bmscs）
mef, 小鼠胚胎成纤维细胞
mm, 小鼠小胶质细胞
mcf, 小鼠心脏成纤维细胞
mn-c, 小鼠皮质神经元
细胞名称
人绒毛膜毛细血管内皮细胞
人羊膜上皮细胞
人绒毛间充质成纤维细胞
人羊膜间充质基质细胞
人绒毛膜间充质基质细胞
正常细胞
nrk-52e，大鼠肾细胞
h9c2大鼠心肌细胞（atcc来源）
c2c12, 小鼠肌原细胞
nih/3t3, 小鼠成纤维细胞系
大鼠骨髓间充质干细胞（bmscs）
hsc-t6, 大鼠肝星状细胞系